觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂:
一.實驗?zāi)康模?/p>
。1)制作洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片
。2)觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時期,比較細(xì)胞周期不同時期的時間長短。
。3)繪制植物細(xì)胞有絲分裂簡圖。
二.實驗原理:
。1)在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見于根尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞。由于各個細(xì)胞的分裂是獨立進(jìn)行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時期的細(xì)胞。
。2)染色體容易被堿性染料(如龍膽紫溶液)著色,通過在高倍顯微鏡下觀察各個時期細(xì)胞內(nèi)染色體(或染色質(zhì))的存在狀態(tài),就可判斷這些細(xì)胞處于有絲分裂的哪個時期,進(jìn)而認(rèn)識有絲分裂的完整過程。
。3)細(xì)胞的分裂具有獨立性:同一組織的不同細(xì)胞,在同一時間內(nèi)可處于細(xì)胞周期的不同分裂時期。
三.實驗步驟:
(1)洋蔥根尖培養(yǎng):課前3-4d,將洋蔥放在盛滿清水的廣口瓶上,讓底都接觸水,放置溫暖處,待根長至5cm時取用。
(2)制作臨時裝片 (解離→漂洗→染色→制片)
。3)觀察:先用低倍鏡觀察,找到分生區(qū)。分生區(qū)細(xì)胞的特點是細(xì)胞呈正方形,排列緊密。然后把觀察目標(biāo)移到視野中央,再換高倍鏡觀察有絲分裂各個時期的細(xì)胞圖像。
知識點撥:
1、制作好洋蔥根尖有絲分裂裝片的關(guān)鍵有以下幾點:
(1)剪取洋蔥根尖材料時,應(yīng)該在洋蔥根尖細(xì)胞一天之中分裂最活躍的時間;
。2)解離時,要將根尖細(xì)胞殺死,細(xì)胞間質(zhì)被溶解,使細(xì)胞容易分離;
。3)壓片時,用力的大小要適當(dāng),要使根尖被壓平,細(xì)胞分散開。
2、操作要點
(1)解離:
①通過解離將細(xì)胞殺死,使細(xì)胞停留在不同的分裂時期。
②解離的目的是使組織細(xì)胞相互分離開。
③解離時間不宜過長或過短:過長會使根尖過分酥軟且染色體成分被破壞;過短使根尖細(xì)胞解離不充分,不能相互分離開。
(2)漂洗:漂洗一定要徹底,防止殘留的解離液繼續(xù)破壞細(xì)胞,同時鹽酸也影響染色和腐蝕鏡頭。
(3)染色:染色液的濃度和染色時間必須掌握好,應(yīng)注意染色不能過深,否則鏡下一片紫色,無法觀察。
(4)壓片:用力要恰當(dāng)均勻,過重可能將組織壓爛' 過輕則不能將細(xì)胞分散開。
(5)顯微鏡下觀察的都是死細(xì)胞,不能看到細(xì)胞分裂的動態(tài)變化,若視野中找不到某一時期的細(xì)胞,可通過移動裝片從鄰近的區(qū)域中找。
知識拓展:
1、“酒精”在不同實驗中的作用:
(1)體積分?jǐn)?shù)95﹪的酒精:與質(zhì)量分?jǐn)?shù)15%的HCI 溶液按1:1的體積比混合作解離液,用于觀察根尖分生組織細(xì)胞有絲分裂的實驗。
(2)體積分?jǐn)?shù)50﹪的酒精:檢測生物組織中(如花生子葉切片)脂肪實驗中,用于洗去蘇丹Ⅲ染色劑染色后切片上的浮色。
(3)無水乙醇:葉綠體中色素提取與分離實驗中用作色素提取劑。
(4)質(zhì)量分?jǐn)?shù)70%的酒精:常用作實驗材料或消毒劑。
2、與細(xì)胞分裂有關(guān)的細(xì)胞器: