單克隆抗體:
1、抗體:一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。
2、單克隆抗體的制備
。1)制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞:向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原,然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細胞
。2)獲得雜交瘤細胞
①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合;
②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞,該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。
。3)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
。4)將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖
。5)提取單克隆抗體:從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取
3、單克隆抗體的應(yīng)用
(1)作為診斷試劑,具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。
(2)用于治療疾病和運載藥物。
血清抗體與單克隆抗體的比較:
知識點撥:
1、融合的結(jié)果是有很多不符合要求的;如有2個B淋巴細胞融合的細胞等,所以要進行篩選。
2、篩選出能夠分泌所需抗體的雜種細胞。
3、雜交瘤細胞的特點:既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。
4、單克隆抗體的優(yōu)點:特異性強,靈敏度高,并能大量制備。
5、單克隆抗體的作用:作為診斷試劑:準確識別各種抗原物質(zhì)的細微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。用于治療疾病和運載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”,也有少量用于治療其它疾病。
知識拓展:
制備單克隆抗體過程中的篩選:篩選是將未融合的B淋巴細胞、骨髓瘤細胞以及BB融合、瘤瘤融合的細胞通過選擇培養(yǎng)基淘汰,篩選出B瘤融合的細胞。篩選是將產(chǎn)生特定抗體的B瘤細胞通過細胞培養(yǎng)用相應(yīng)抗原檢測的辦法篩選出來。因為從體內(nèi)取免疫過的B淋巴細胞時取出很多種,形成的雜交瘤細胞有很多種,所以需篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。