生物組織中糖類、脂肪和蛋白質(zhì)的檢測(cè)方法:
1、檢測(cè)原理:
生物組織中某些有機(jī)化合物能與某些化學(xué)試劑產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。
(1)糖類
(2)脂肪
(3)蛋白質(zhì)
2、檢測(cè)步驟
(1)還原糖的檢測(cè)與觀察:
(2)脂肪的檢測(cè):
(3)蛋白質(zhì)的檢測(cè):
(4)淀粉的檢測(cè)與觀察:
斐林試劑與雙縮脲試劑的比較:
斐林試劑雙縮脲試劑
鑒定成分還原糖蛋白質(zhì)
鑒定原理還原糖中的醛基(-CHO)在加熱條件下能將Cu(OH)2中的Cu2+還原成Cu+,從而生成磚紅色的Cu.0沉淀雙縮脲(H2NOC-NH-CONH2)在堿性溶液中能與Cuz+結(jié)合生成紫色絡(luò)合物,蛋白質(zhì)分子中含有與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵
試劑濃度甲液:質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液;乙液:質(zhì)量濃度為0.05g/mL的CuSO4溶液A液:質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液;B液:質(zhì)量濃度為0.01g/mL的CuSO4溶液
使用方法甲液、乙液混合均勻后,再加入樣液先加A液造成堿性環(huán)境,再滴加B液
使用條件加熱不加熱
實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象淺藍(lán)色一棕色—磚紅色紫色
知識(shí)點(diǎn)撥:
(1)在還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中,最理想的實(shí)驗(yàn)材料是含還原糖量較高的生物組織(或器官),而且組織顏色較淺,或近于白色的蘋果、梨等材料。另外,由于甘蔗、甜菜中含有的蔗糖是非還原糖,不宜選用。
(2)在脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中,實(shí)驗(yàn)材料最好選擇富含脂肪的種子。
(3)在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織,植物材料常用的是大豆,動(dòng)物材料常用的是稀釋的雞蛋清。
注意事項(xiàng):
還原糖的檢測(cè)和觀察:
、龠原糖有葡萄糖,果糖,麥芽糖;
、诩滓乙罕仨毜攘炕旌暇鶆蚝笤偌尤霕右褐,現(xiàn)配現(xiàn)用;
③必須用水浴加熱
脂肪的鑒定:
、偾衅。绾癖〔痪蜁(huì)導(dǎo)致觀察時(shí)有的地方清晰,有的地方模糊。
②酒精的作用是:洗去浮色
、坌枋褂蔑@微鏡觀察
④使用不同的染色劑染色時(shí)間不同
蛋白質(zhì)的鑒定:
、傧燃覣液1ml,再加B液4滴
、阼b定前,留出一部分組織樣液,以便對(duì)比