綠葉中色素的提取和分離:
1.原理
(1)各種色素能溶解在有機(jī)溶劑(無水乙醇等)中形成溶液,使色素從生物組織中脫離出來。
(2)各種色素都能溶解在層析液中,但在層析液中的溶解度不同。溶解度大的色素分子隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快,反之則慢,因而不同色素可以在濾紙上通過擴(kuò)散分開,各種色素分子在濾紙上可形成不同的色素帶。
2.實驗過程
觀察結(jié)果:濾紙條上色素帶有四條,由上到下分別是胡蘿卜素、黃色的葉黃素、藍(lán)綠色的葉綠素、黃色的葉黃素、藍(lán)綠色的葉綠素a、黃綠色的葉綠素b,
如圖
實驗要點及注意事項:
1、實驗中幾種化學(xué)藥品的作用
①加入少量SiO2,可破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),使研磨更充分,便于色素完全釋放。
、诩尤肷倭緾aCO3,,可以中和細(xì)胞內(nèi)的有機(jī)酸,防止有機(jī)酸奪取葉綠素中的鎂離子使葉綠素破壞,從而起到保護(hù)色素的作用。但SiO2.和CaCO3的加入量要少,否則濾液雜質(zhì)多、混濁、顏色淺,實驗效果差。 2、實驗成功的關(guān)鍵
、偃~片要新鮮,顏色要深綠,保證色素的含量。
、谘心ヒ杆俪浞帧H~綠素不穩(wěn)定,易被破壞,時間過長或研磨不充分都會導(dǎo)致色素的量太少而使實驗失敗。
③濾液細(xì)線不僅要求細(xì)、直、均勻,而且要求含有較多的色素(可以重復(fù)畫二至三次)。
、転V液細(xì)線不能觸及層析液,否則色素溶解到層析液中,將得不到清晰的色素帶。
3、注意事項
①制備濾紙條時,要剪去兩角,這樣可以減小邊緣效應(yīng),使色素在濾紙上擴(kuò)散均勻,便于觀察實驗結(jié)果。 ②收集濾液后,要及時用棉塞將試管口塞緊,防止濾液揮發(fā)。
4、濾紙條上的濾液細(xì)線,不能觸及層析液的原因:濾紙條上的濾液細(xì)線如觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中,實驗就會失敗。
5、提取和分離葉綠體色素的關(guān)鍵:
。1)提取葉綠體色素的關(guān)鍵是:①葉片要新鮮、濃綠;②研磨要迅速、充分;③濾液收集后,要及時用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發(fā)。
。2)分離葉綠體色素的關(guān)鍵是:①是濾液細(xì)線要細(xì)且直,而且要重復(fù)劃幾次;②是層析液不能沒及濾液線。
6、收集到的色素濾液綠色過淺,可能原因如下:
、傥醇佣趸,研磨不充分。
、谑褂梅胖脭(shù)天的菠菜葉,濾液中色素(葉綠素)太少,綠色過淺。
、垡淮渭尤氪罅康95%的乙醇,提取濃度太低(正確做法:分次加入少量95%的乙醇提取色素)。
④未加碳酸鈣或加入過少導(dǎo)致色素分子被破壞。
7、如果濾紙條色素帶重疊,原因可能是濾紙條上的濾液細(xì)線接觸到層析液。
知識拓展:
實驗創(chuàng)新:本實驗中的長條濾紙可以改為圓形濾紙,在濾紙的中央滴一滴濾液,然后用一根浸有層析液的棉線的一端垂直接觸濾液的中必位置,會得到近似同心的四個色素環(huán),由內(nèi)到外依次是黃綠色、藍(lán)綠色、黃色、橙黃色。
例 以“葉綠體中色素的提取和分離”實驗中,下列描述正確的是( )
A.將5g新鮮完整的菠菜葉,放入研缽中,加入無水乙醇、石英砂、CaCO3以后,迅速研磨
B.用毛細(xì)吸管吸取少量濾液;沿鉛筆線處小心均勻地畫出一條濾液細(xì)線,并連續(xù)迅速地重復(fù)畫2~3次
C.把畫好細(xì)線的濾紙條插入層析液中,并不斷搖晃,以求加快色素在濾紙條上的擴(kuò)散
D.色素分子是有機(jī)物,不溶于水,所以研磨過程中加入無水乙醇是為了溶解色素
答案D